Dalam penelitian biologi biasanya digunakan polipeptida dengan urutan yang panjang.Untuk peptida dengan lebih dari 60 asam amino dalam urutannya, ekspresi gen dan SDS-PAGE umumnya digunakan untuk mendapatkannya.Namun cara ini memakan waktu lama dan efek pemisahan produk akhir kurang baik.
Tantangan dan solusi untuk sintesis peptida panjang
Dalam sintesis peptida panjang, kita selalu dihadapkan pada suatu permasalahan, yaitu hambatan sterik pada reaksi kondensasi meningkat seiring dengan bertambahnya urutan dalam sintesis, dan waktu reaksi perlu disesuaikan agar reaksi selesai.Namun, semakin lama waktu reaksi, semakin banyak efek samping yang dihasilkan, dan sebagian peptida target terbentuk.Residu tersebut – kekurangan rantai peptida adalah pengotor utama yang dihasilkan dalam sintesis peptida panjang.Oleh karena itu, dalam sintesis peptida panjang, masalah utama yang harus kita atasi adalah mengeksplorasi kondisi reaksi dan metode reaksi berkualitas tinggi, sehingga reaksi kondensasi asam amino menjadi lebih komprehensif dan lengkap.Selain itu, kurangi waktu reaksi, karena semakin lama waktu reaksi, semakin tidak terkendalinya reaksi samping, sehingga semakin kompleks pula produk samping yang dihasilkan.Oleh karena itu, tiga poin berikut dapat dirangkum:
Sintesis gelombang mikro dapat digunakan: Untuk beberapa asam amino yang ditemui dalam proses sintesis yang tidak mudah diintegrasikan, dapat digunakan sintesis gelombang mikro.Metode ini memberikan hasil yang luar biasa, dan sangat mengurangi waktu reaksi, serta mengurangi pembentukan dua produk sampingan utama.
Metode sintesis fragmen dapat digunakan: Ketika beberapa peptida sulit disintesis dengan metode sintesis umum dan tidak mudah dimurnikan, kita dapat mengadopsi seluruh kondensasi beberapa asam amino dalam segmen peptida tertentu ke rantai peptida secara keseluruhan.Metode ini juga dapat menyelesaikan banyak permasalahan dalam sintesis.
Sintesis asilhidrazida dapat digunakan: sintesis asilhidrazida peptida adalah metode sintesis fase padat peptida Cys terminal-N dan hidrazida polipeptida terminal-C, reaksi selektif kimia antara pembentukan ikatan amino untuk mencapai metode ikatan peptida.Berdasarkan posisi Cys dalam rantai peptida, metode ini membagi seluruh rantai peptida menjadi beberapa rangkaian dan mensintesisnya masing-masing.Terakhir, peptida target diperoleh melalui reaksi kondensasi fase cair.Metode ini tidak hanya mengurangi waktu sintesis peptida panjang secara signifikan, tetapi juga secara signifikan meningkatkan kemurnian produk akhir.
Pemurnian peptida panjang
Kekhasan peptida panjang pasti mengarah pada komponen kompleks peptida kasar.Oleh karena itu, memurnikan peptida panjang dengan HPLC juga merupakan tantangan.serangkaian proses pemurnian polipeptida amiloid, menyerap banyak pengalaman dan berhasil digunakan dalam pemurnian peptida panjang.Dengan mengadopsi peralatan baru, pencampuran beberapa sistem pemurnian, pemisahan berulang, dan metode pengalaman lainnya, tingkat keberhasilan pemurnian peptida panjang meningkat pesat.
Waktu posting: 18 April-2023