Dalam penelitian biologis, polipeptida dengan urutan panjang biasanya digunakan. Untuk peptida dengan lebih dari 60 asam amino dalam urutan, ekspresi gen dan SDS-PAGE umumnya digunakan untuk mendapatkannya. Namun, metode ini membutuhkan waktu lama dan efek pemisahan produk akhir tidak baik.
Tantangan dan Solusi untuk Sintesis Peptida Panjang
Dalam sintesis peptida panjang, kita selalu dihadapkan dengan masalah, yaitu, hambatan sterik dari reaksi kondensasi meningkat dengan meningkatnya urutan dalam sintesis, dan waktu reaksi perlu disesuaikan untuk membuat reaksi lengkap. Namun, semakin lama waktu reaksi, semakin banyak efek samping yang dihasilkan, dan sebagian peptida target terbentuk. Residu seperti itu - rantai peptida yang kurang adalah kotoran utama yang diproduksi dalam sintesis peptida panjang. Oleh karena itu, dalam sintesis peptida panjang, masalah utama yang harus kita atasi adalah untuk mengeksplorasi kondisi reaksi berkualitas tinggi dan metode reaksi, sehingga membuat reaksi kondensasi asam amino lebih komprehensif dan penuh. Selain itu, kurangi waktu reaksi, karena semakin lama waktu reaksi, reaksi samping yang lebih tidak terkendali, semakin kompleks produk sampingan. Oleh karena itu, tiga poin berikut dirangkum:
Sintesis microwave dapat digunakan: Untuk beberapa asam amino yang ditemui dalam proses sintesis yang tidak mudah diintegrasikan, sintesis microwave dapat digunakan. Metode ini memiliki hasil yang luar biasa, dan sangat mengurangi waktu reaksi, dan mengurangi pembentukan dua produk sampingan utama.
Metode sintesis fragmen dapat digunakan: Ketika beberapa peptida sulit disintesis dengan metode sintesis umum dan tidak mudah untuk dimurnikan, kita dapat mengadopsi seluruh kondensasi beberapa asam amino dalam segmen peptida tertentu ke rantai peptida secara keseluruhan. Metode ini juga dapat menyelesaikan banyak masalah dalam sintesis.
Sintesis asilhidrazida dapat digunakan: Sintesis peptida asilhidrazida adalah metode sintesis fase-padat peptida Cys terminal-N dan reaksi selektif kimia polipeptida C-terminal hidrazida antara pembentukan ikatan amida untuk mencapai metode ikatan peptida. Berdasarkan posisi CYS dalam rantai peptida, metode ini membagi seluruh rantai peptida menjadi beberapa urutan dan masing -masing mensintesisnya. Akhirnya, peptida target diperoleh melalui reaksi kondensasi fase cair. Metode ini tidak hanya sangat mengurangi waktu sintesis peptida panjang, tetapi juga secara signifikan meningkatkan kemurnian produk akhir.
Pemurnian peptida panjang
Kekhasan peptida panjang pasti mengarah pada komponen kompleks peptida mentah. Oleh karena itu, juga merupakan tantangan untuk memurnikan peptida panjang dengan HPLC. Seri amiloid proses pemurnian polipeptida, menyerap banyak pengalaman dan berhasil digunakan dalam pemurnian peptida panjang. Dengan mengadopsi peralatan baru, pencampuran beberapa sistem pemurnian, pemisahan berulang dan metode pengalaman lainnya, tingkat keberhasilan pemurnian peptida panjang sangat ditingkatkan.
Waktu posting: 2025-07-03