Modifikasi fosforilasi memainkan peran penting dalam kehidupan sel dan mempengaruhi banyak aspek. Fosforilasi protein terkait erat dengan berbagai proses biologis, seperti perbaikan kerusakan DNA, regulasi transkripsi, transduksi sinyal, dan regulasi apoptosis sel. Mempelajari protein dan peptida terfosforilasi membantu mengungkapkan mekanisme proses ini dan memperdalam pemahaman kita tentang esensi kegiatan kehidupan. Bioteknologi peptida Hong memiliki teknologi pelabelan peptida fosforilasi yang matang. Memanfaatkan keunggulan teknologi dan bahan baku sendiri, kita dapat mensintesis peptida yang mengandung serin terfosforilasi (PSER), treonin terfosforilasi (PTHR), dan tirosin terfosforilasi (ptyr), dan menyediakan peptida berkualitas tinggi dengan satu hingga lima lokasi fosforilasi.
Tinjauan Teknologi Penandaan Fosforilasi:
Peptida terfosforilasi terutama merujuk pada kelompok hidroksil rantai samping serin (Ser), tirosin (Tyr), dan residu treonin (THR) dalam rantai peptida yang dimodifikasi menjadi ester fosfat asam. Peptida terfosforilasi memainkan peran penting dalam studi fosforilasi protein. Oleh karena itu, sangat penting untuk mengeksplorasi reaksi fosforilasi protein dan peptida dan untuk menemukan metode sintetis yang matang dan sederhana.
Saat ini, metode untuk modifikasi fosforilasi peptida terutama terbagi dalam dua kategori:
(1) Secara langsung memasukkan asam amino terfosforilasi yang dilindungi dengan tepat ke dalam urutan peptida:
Pertama, asam amino yang perlu difosforilasi (seperti THR, Ser atau Tyr) menjadi sasaran pengobatan fosforilasi dan dilindungi dengan tepat. Kemudian, mengikuti proses sintesis peptida fase padat konvensional (SPPS), monomer terfosforilasi terkait dengan situs spesifik polipeptida. Metode ini mudah dioperasikan dan telah menjadi salah satu teknik utama untuk modifikasi fosforilasi titik peptida.
(2) Setelah mensintesis urutan polipeptida pada resin, gugus hidroksil rantai samping dari Ser, Tyr atau THR terfosforilasi:
Saat melakukan modifikasi fosforilasi, jika metode untuk secara langsung mengkondensasi monomer terfosforilasi ke dalam polipeptida diadopsi, asam amino terfosforilasi, karena rantai sampingnya yang lebih besar, menyebabkan peningkatan hambatan sterik, membuat kondensasi dengan rantai peptida menjadi sulit. Selain itu, pengenalan asam amino berikutnya juga akan menjadi relatif kompleks, terutama ketika ada beberapa situs fosforilasi. Proses sintesis akan sangat sulit, dan produk akhir akan sangat kompleks, membuat pemisahan menjadi sulit dan hasilnya sangat rendah. Oleh karena itu, ketika ada beberapa situs yang membutuhkan fosforilasi dalam rantai polipeptida, dapat dipertimbangkan untuk menyelesaikan sintesis urutan polipeptida pada resin terlebih dahulu, dan kemudian memfosforilasi gugus hidroksil rantai samping dari Ser, Tyr atau Thr. Selama proses ini, pertama -tama lepaskan kelompok pelindung rantai samping asam amino yang akan diberi label. Untuk Tyr dan THR, asam amino yang tidak terlindungi dari rantai sampingnya dapat bereaksi langsung. Kelompok pelindung rantai samping dapat dihilangkan secara kuantitatif dengan kondisi 1% TFA/DCM. Dalam metode ini, perantara aktif dari bis-benzyl fosforamidate dan tetrazole dapat dihasilkan oleh reaksi dengan yang terakhir, dan dapat dihubungkan dengan gugus hidroksil. Kemudian, reaksi oksidasi di bawah kondisi asam peroksida dapat dilakukan untuk menghasilkan gugus fosfonil, menyelesaikan fosforilasi.
Waktu posting: 2025-07-16