Resistensi kimia peptida tergantung pada komposisi dan urutan asam amino. Peptida yang diliofilisasi umumnya lebih tahan lama daripada rekan -rekannya dalam larutan. Metode degradasi peptida potensial adalah sebagai berikut:
1, Hidrolisis: Ini biasanya termasuk dalam ASP dalam urutan (D) untuk masalah dalam peptida, sangat mudah didehidrasi untuk membentuk cincin imide intermediate. Misalnya, ada ASP dalam urutan. -Pro (DP) Dalam hal ini, perantara imide berbentuk cincin yang diproduksi oleh katalisis asam akan menyebabkan pembelahan rantai peptida. Demikian pula, ASP-Gly (DG) hadir dalam urutan dan dalam hal ini perantara melingkar dapat dihidrolisis ke dalam mode ASP asli asam isoaspartat (tidak berbahaya) atau analog yang berpotensi tidak aktif. Akhirnya, semua pola asam aspartat dapat sepenuhnya dikonversi menjadi analog asam isoaspartat. "Pada tingkat yang lebih kecil, mengandung Ser (S), urutan yang juga membentuk perantara Imide melingkar yang pada akhirnya membersihkan rantai peptida."
2, Deamidasi: Basis ini mengkatalisasi reaksi sering terjadi dengan adanya ASN-Gly (NG) atau GLN-Gly (QG) dalam urutan dan mengikuti mekanisme urutan ASP-Gly (DG) yang serupa. Deaminasi (kehilangan amina) dalam urutan ASN-GLY menghasilkan intermediate siklik imida, yang kemudian dihidrolisis untuk menghasilkan asam aspartat aspartat atau analog asam isoaspartat. Selain itu, perantara cincin-imida dapat menyebabkan d-Asp atau elotasi eksternal ke ASND-ISO -Menam mirip dengan ASP, yang semuanya mungkin tidak aktif.
3, Oksidasi: Cys dan residu MET adalah residu utama yang mengalami oksidasi reversibel. Oksidasi sistein dipercepat pada nilai pH yang lebih tinggi, di mana tiol lebih mudah menghilangkan protonasi dan cenderung menghasilkan ikatan disulfida di dalam atau di antara rantai. Ikatan disulfida dapat dengan mudah dibalik dengan pengobatan dengan dithiothreitol (DTT) atau Tris (2-carboxylethylphosphine) hidroklorida (TCEP). Metionin dioksidasi oleh bahan kimia dan fotokimia untuk menghasilkan metionin dioksida, yang selanjutnya memasuki metionin dioksida, yang keduanya sulit untuk dibalik.
4, Diketopiperazine and pyroglutamic acid production: formation of dimethylpiperazine usually occurs when Gly is in the third position of the N terminus, especially if Pro or Gly is in position 1 or 2. This reaction involves nucleophilic attack of the N-terminal nitrogen on the amide benzyl group between the second and third amino acids, resulting in cleavage of the first two amino acids of the Metode diketopiperazine. Di sisi lain, jika GLN terletak di N-terminus, pembentukan asam pyroglutamic hampir tidak bisa dihindari. Ini adalah reaksi serupa di mana nitrogen N-terminal menyerang karbon rantai samping GLN untuk membentuk deaminasi analog piroglutamil peptida. Konversi ini juga terjadi dengan N-terminus yang mengandung analog peptida piroglutamat.
5. Racemization: Istilah ini banyak digunakan untuk merujuk pada hilangnya keseluruhan integritas kiral dari asam amino atau peptida. Racemization melibatkan konversi asam amino dari enansiomer yang dikatalisis basa, biasanya L-form, ke tipe 1 enansiomer L-dan-D. : 1. Campuran. Ini lebih penting selama generasi peptida, tetapi kurang bermasalah pada peptida jadi. Selain itu, sakelar sulit dideteksi dan tidak dapat dikendalikan.
Pendekatan umum untuk menghindari atau meminimalkan degradasi peptida adalah untuk menurunkan peptida menjadi-20 ° C atau lebih baik-80 ° C untuk penyimpanan kering-beku, jika tersedia. Jika peptida dalam larutan berair, setiap sampel alikuot harus dibekukan untuk menghindari pembekuan dan pencairan. Paparan ph & gt harus dihindari; Medium 8. Namun, jika ph & gt diperlukan; Jika peptida meleleh pada 8, paparannya harus minim.
Waktu posting: 2025-07-01