Mengikuti sintesis kimia peptida dengan FMOC fase padat, ada banyak metode pembelahan, dan dua tipe dasar sekarang diperkenalkan yang biasa kita gunakan.
1. Metode Asam Kuat (TFA)
Resin kering ditempatkan ke dalam labu goyang dan jumlah pemulung yang sesuai ditambahkan. (Pemulung) Reagen pemotongan asam trifluoroasetat (TFA), resin 10-25ml/g, ditutup dan dikocok sebentar-sebentar pada suhu kamar dengan rotasi. Resin dikeringkan, dicuci 2-3 kali dengan TFA baru, filtrat digabungkan, dan 8-10 kali volume es dietil eter dijatuhkan. Terkadang, beberapa TFA dapat dikukus untuk mendapatkan endapan peptida mentah. Eter dapat digunakan untuk meningkatkan efisiensi curah hujan dengan pendinginan yang dibantu ICE. Akhirnya, produk peptida mentah yang diendapkan dikumpulkan.
Resin yang cocok: resin wang atau resin arena amida
2, metode asam lemah (TFA atau pengenceran asam asetat) 1% TFA:
1G resin yang mengandung peptida ditambahkan ke labu goyang kaca larutan diklorometana yang mengandung 1%TFA, disegel dan dikocok selama 2 menit. Filtrat ditekan dengan nitrogen ke dalam labu shake metanol baru yang mengandung 10% piridin, dan prosedur diulangi 10 kali. Peptida pelindung yang tersisa pada resin dicuci tiga kali menggunakan 30ml DCM dan 30ml MeOH. Residu diperiksa dan dibersihkan oleh TLC atau HPLC. Semua filtrat digabungkan dan 5% dari pelarut dimasak di bawah tekanan berkurang. Empat puluh ml air ditambahkan dan presipitasi dibantu dengan campuran pendingin. Setelah penyaringan, produk dicuci tiga kali dengan air bersih, ditempatkan dalam oven pengeringan vakum, dan dikeringkan dengan KOH atau P2O5.
Asam asetat encer:
Peptida yang digantung pada resin diperlakukan dengan larutan pemotongan selama 2 jam menggunakan ACOH // TFE/DCM (2: 2: 6), resin disaring, dan resin dicuci tiga kali dengan larutan pemotongan. Kelebihan asam asetat dihilangkan dengan menambahkan 15 kali lipat N-heksana ke filtrat campuran dan penyeduhan putar.
Resin Aplikasi: Resin 2-CTC
Waktu posting: 2025-07-01